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SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 3644—2013 出口燕窝及其制品中睡液酸的测定方法 Determination of Sialic acid in cubilose and its products for export 行业标准信息服务平台 2013-08-30发布 2014-03-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T3644—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:中华人民共和国广东出人境检验检疫局 本标准主要起草人:黄华军、李敏、奚星林、林峰、陈文锐、席静、陈秀明、李双、潘丙珍、庞世琦。 行业标准信息服务平台 SN/T3644—2013 出口燕窝及其制品中睡液酸的测定方法 1范围 本标准规定了出口燕窝及其制品中睡液酸检测的分光光度法和液相色谱-质谱/质谱确证方法。 本标准适用于出口燕窝及其制品中睡液酸含量的测定和确证。 2方法提要 将燕窝中的糖蛋白用醋酸水解,释放出的睡液酸与酸性三酮形成稳定的黄色化合物,用分光光度 法定量测定,以液相色谱-质谱质谱确证。 3 安全提示 本方法中的一些试验过程可能导致危险情况,使用的部分试剂具有腐蚀性或刺激性,还有高温加热 过程,操作时须小心谨慎!操作者应采取适当的安全和健康措施,必要时佩戴橡胶手套或棉纱手套。 4试剂和材料 除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为实验室三级水。 4.1甲醇,HPLC级 4.2冰醋酸。 4.350%醋酸溶液:分别量取50mL冰醋酸和50mL水,混匀备用 你唯 4.4盐酸。 4.5硫酸铵。 4.6节三酮。 4.7 节三酮指示剂:往2.5g三酮中加入60mL冰醋酸和40ml.盐酸,搅拌溶解。 4.8透析袋:截留分子量14000。 4.9睡液酸标准物质(N-Acetylneuraminicacid,CAS号131-48-6):纯度≥99%,在-18℃保存。 4.10睡液酸标准溶液(200μL/mL):准确称取适量唾液酸标准物质,用水配成浓度为200μg/mL的 唾液酸标准溶液。该溶液即配即用。 4.11沸石。 5仪器和设备 5.1可见分光光度计。 5.2液相色谱-质谱/质谱联用仪:配有电喷雾离子源 5.3烘箱,102℃~105℃。 5.4研钵。 5.5筛网:100目筛。 SN/T3644—2013 5.6电子天平:感量为0.01mg和0.001g。 5.7磨砂口三角瓶:250mL。 5.8加热设备:平板电炉。 5.9冷凝回流装置。 5. 107 离心管:50mL,聚丙烯材质(PP)。 5.11 离心机:3000r/min,12000r/min。 5.12 比色管:10mL,玻璃材质。 5.13 比色皿:lcm,石英材质。 5.14 容量瓶:100mL,玻璃材质。 5.15 移液枪:2mL,10mL。 6样品制备 6.1固体燕窝的制备 取燕窝样品在105℃烘箱中烘干,在干燥器中冷却后研磨,过100目筛后装人洁净容器,密闭备用。 6.2燕窝制品的制备 液体状态的燕窝制品,用打浆机制样,静置等待泡沫与样液分层后,去泡沫(或用离心机离心分 7测定步骤 7.1睡液酸提取 7.1.1固体燕窝的睡液酸提取 称取0.1g(精确到0.001g)样品粉末(6.1)到磨砂口三角瓶中,加入50%醋酸溶液(4.3)20.0mL, 加沸石几颗。置于加热板上,安装好冷凝回流管,加热至沸,计时10min。取下三角瓶,可用流动水快 速冷却瓶壁,水解液降至室温后,经漏斗转移到100mL容量瓶,用适量水洗涤三角瓶两次,最后用蒸馏 水定容。摇匀后倒出10.0mL到加有1.2g硫酸铵的离心管中.用玻棒搅匀,使硫酸铵溶解,紧盖子, 放人离心机,3000r/min离心10min。上清液备用。 7.1.2液态燕窝制品的睡液酸提取 称取10g(精确到0.001g)样液(6.2)到磨砂口三角瓶中,加入冰醋酸10.0mL,加沸石几颗,置于 加热板上,安装好冷凝回流管,加热至沸,计时10min。取下三角瓶,可用流动水快速冷却瓶壁,水解液 降至室温后,经漏斗转移到100mL容量瓶,用适量水洗涤三角瓶两次,最后用蒸馏水定容。摇匀后倒 出10.0mL到加有1.2g硫酸铵的离心管中,用玻棒搅匀,使硫酸铵溶解,拧紧盖子,放入离心机, 3000r/min离心10min,上清液备用。 如果燕窝制品很浓稠,在加热水解时容易焦糊,则称样5g(精确到0.001g),加入50%醋酸溶液 15.0mL,后续步骤如上。 7.2睡液酸含量的测定 7.2.1分光光度法测定 取上清液(7.1)2.0mL于10mL比色管中,再加人节三酮指示剂(4.7)2.0mL与冰醋酸2.0mL, 2
SN-T 3644-2013 出口燕窝及其制品中唾液酸的测定方法
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